راضیه پورسعید؛ خلیل بِردی فتوحی فر؛ رسول زارع
چکیده
در این تحقیق برای شناسایی ایدیومورف های تیپ آمیزشی و باروری جنسی، از برخی رودخانه‌ها، دریاچه‌ها، تالاب‌ها و سدهای واقع در 10 استان (آذربایجان‌شرقی، البرز، بوشهر، خراسان جنوبی، خوزستان، فارس، کردستان، گیلان، لرستان و مازندران) نمونه برداری شد. در هر محل، نمونه ها از سه بستر آب، رسوبات و کف (حباب‌های ریز روی آب) اخذ شدند. برای جداسازی ...
بیشتر
در این تحقیق برای شناسایی ایدیومورف های تیپ آمیزشی و باروری جنسی، از برخی رودخانه‌ها، دریاچه‌ها، تالاب‌ها و سدهای واقع در 10 استان (آذربایجان‌شرقی، البرز، بوشهر، خراسان جنوبی، خوزستان، فارس، کردستان، گیلان، لرستان و مازندران) نمونه برداری شد. در هر محل، نمونه ها از سه بستر آب، رسوبات و کف (حباب‌های ریز روی آب) اخذ شدند. برای جداسازی جدایه‌ها از محیط‌کشت آب-آگار حاوی آنتی‌بیوتیک و دمای 25 درجه سلسیوس و نور متناوب و محیط‌کشت پپتون پی سی ان بی آگار حاوی آنتی‌بیوتیک استفاده شد. تعداد 51 جدایه از F. proliferatum به دست آمد. شناسایی ریختشناختی روی محیط کشت‌های برگ میخک-آگار، سیب‌زمینی-دکستروز-آگار و SNA انجام گرفت. سپس جدایه‌ها با استفاده از آغازگرهای اختصاصی گونه شناسایی شدند. برای تعیین ایدیومورف‌های تیپ آمیزشی از آغازگرهای طراحی شده بر اساس جایگاه‌های ژنی MAT در آزمون multiplex PCR استفاده شد. از 51 جدایه، تیپ آمیزشی 28 جدایه (9/54 درصد) از نوع MAT-1 و 23 جدایه (1/45 درصد) از نوع MAT-2 تشخیص داده شد. به منظور بررسی وضعیت باروری جنسی، جدایه-های یک تیپ آمیزشی با تمام جدایههای تیپ آمیزشی مخالف روی محیط‌کشت هویج-آگار تلاقی داده شدند. در مجموع 1288 تلاقی بین جدایه‌ها انجام گرفت. در نتیجه، در 102 تلاقی پریتسیوم‌های بارور مشاهده شدند که آسکوسپورهای تولید شده در آن‌ها 70 تا 80 درصد قابلیت جوانه‌زنی داشتند. پریتسیوم‌ها در تلاقی‌های چهار جدایه ماده بارور با جدایههای تیپ آمیزشی مخالف تولید شدند. فراوانی ایدیومورف‌های تیپ آمیزشی و وضعیت باروری جنسی جدایههای مورد بررسی، تایید کننده احتمال وقوع تولیدمثل جنسی بین جدایههای این گونه در اکوسیستم های آبی می‌باشد.
وحید خسروی؛ محمد جوان نیکخواه؛ حسین صارمی؛ شهرام نعیمی؛ رسول زارع
چکیده
در جریان بازدید از شالیزارهای برنج استانهای فارس و خوزستان در مرحلۀ سفت شدن دانه، 42 نمونه بذر گردآوری شد. برای جداسازی Fusariumاز نمونهها، بذرها روی محیط غذایی اختصاصی فوزاریوم (Pepton-PCNB-Agar, PPA) به دو روش ضدعفونی با محلول هیپوکلریت سدیم 1درصد و بدون ضدعفونی کشت و در انکوباتور (اتاقک رشد) با دمای 1±25 درجۀ سلسیوس و نور متناوب (روشنایی ...
بیشتر
در جریان بازدید از شالیزارهای برنج استانهای فارس و خوزستان در مرحلۀ سفت شدن دانه، 42 نمونه بذر گردآوری شد. برای جداسازی Fusariumاز نمونهها، بذرها روی محیط غذایی اختصاصی فوزاریوم (Pepton-PCNB-Agar, PPA) به دو روش ضدعفونی با محلول هیپوکلریت سدیم 1درصد و بدون ضدعفونی کشت و در انکوباتور (اتاقک رشد) با دمای 1±25 درجۀ سلسیوس و نور متناوب (روشنایی و تاریکی) نگهداری شدند. 26 جدایه بر اساس ویژگی‌های ریختشناختی روی محیط‌های کشت PDA، CLAو SNAو استفاده از منابع معتبر شناسایی شد. همچنین ارزیابی فیلوژنیک (تبارزایی) 18 و 6 جدایۀ منتخب بر اساس توالی ناحیۀ ژنی TEF1-αو توالی نوکلئوتیدی ناحیۀ ITSانجام گرفت. نتایج نشان داد، جدایههای Fusariumمورد بررسی، متعلق به دو گونۀ مرکب FIESC(Fusarium incarnatum-equiseti species complex) و GFSC(Gibberella fujikuroi species complex)، به ترتیب با فراوانی50 و 46 درصد بودند. F. fujikuroiدر استان فارس و F. semitectumدر استان خوزستان بیشترین فراوانی را داشتند. در این تحقیق دو گونۀ F. fujikuroiو F. andiyaziمتعلق به گونۀ مرکب GFSCبر اساس توالی ژن TEF1-α، در دو کلاد مجزا تفکیک شدند. توالییابی ناحیۀ ژنی TEF1-αبرای تفکیک و شناسایی اعضای گونۀ مرکب GFSCمفید است اما توالی ناحیۀ ITSنتوانست این گونهها را شناسایی و از همدیگر تفکیک کند. تک جدایۀ F. merismoidesکه بر اساس ویژگی‌های ریختشناختی شناسایی شد، توسط توالی ژن TEF1-αشناسایی نشد اما در درخت فیلوژنیک رسم‌شده بر اساس توالی ناحیۀ ITSاز جنس Fusariumتفکیک و به جنس Fusicollaو گونۀ F. acetilereaمنتقل شد.
