شیرین پریزاد؛ اکبر دیزجی؛ مینا کوهی حبیبی؛ غلامحسین مصاحبی محمدی؛ سیامک کلانتری؛ فاطمه ایزدپناه
چکیده
پس از نمونه‌برداری تصادفی از برگ‌ها و بنه‌های گیاه زعفران (Crocus sativus L.) از شش استان کشور در سال‌های 1390 تا 1394، شمار 641 از 890 نمونه با آنتی‌بادیهای عمومی جنس پوتیویروس و همان‌طور با آنتیبادی اختصاصی ویروس موزاییک معمولی لوبیا(BCMV) در آزمون الایزا واکنش مثبت نشان داد. وزن مولکولی پروتئین پوششی (CP) چند جدایة مورد بررسی پوتیویروس ...
بیشتر
پس از نمونه‌برداری تصادفی از برگ‌ها و بنه‌های گیاه زعفران (Crocus sativus L.) از شش استان کشور در سال‌های 1390 تا 1394، شمار 641 از 890 نمونه با آنتی‌بادیهای عمومی جنس پوتیویروس و همان‌طور با آنتیبادی اختصاصی ویروس موزاییک معمولی لوبیا(BCMV) در آزمون الایزا واکنش مثبت نشان داد. وزن مولکولی پروتئین پوششی (CP) چند جدایة مورد بررسی پوتیویروس زعفران با استفاده از آزمون وسترن بلات 35 کیلو دالتون محاسبه شد. پس از استخراج آر.ان.ا کل از گیاهان آلوده، سه قطعه منقطع از ژنوم (مربوط به انتهای '3 ژنوم و بخشی از نواحی CI و HC-Pro) تکثیر شد. پروتئین پوششی (CP) پوتیویروس زعفران بر پایة توالی نوکلئوتیدی بیشترین یکسانی را (74 درصد) با Ceratobium mosaic virus و Telosma mosaic virus و بر پایة توالی ترجمة اسیدآمینه‌ای بیشترین یکسانی را (8/78 درصد) با Bean common mosaic necrosis virus داشت. به‌رغم رابطة سرم‌شناختی (سرولوژیکی) بالای این پوتیویروس با BCMV و خویشاوندی تبارزایی (فیلوژنتیکی) با زیرگروه BCMV بر پایة ناحیة CP، میزان یکسانی توالی نوکلئوتیدی و ترجمه اسید آمینهای پروتئین پوششی آن کمتر از آستانة تعیین حدود و گسترة گونه در جنس پوتیویروس است. لذا به‌احتمال‌زیاد پوتیویروس آلوده‌کنندة زعفران گونة جدیدی از جنس پوتیویروس بوده که اظهارنظر قطعی مستلزم تعیین توالی کل ژنوم آن است.
محمدرضا محمدی؛ مینا کوهی حبیبی؛ غلامحسین مصاحبی محمدی
دوره 40، شماره 1 ، شهریور 1388
چکیده
طی فصل زراعی سال 1382 تعداد 231 نمونه برگی از ذرت‌های آلوده به ویروس و دارای علایم موزائیک و در مواردی علایم موزائیک همراه با کوتولگی، از مزارع ذرت مناطق مختلف استان تهران جمع‌آوری گردید. با استفاده از آنتی‌سرم‌های پلی‌کلونال چهار پوتیویروس MDMV،SCMV ، SrMV وJGMV بر روی نمونه‌ها آزمون‌های سرولوژیکیDAS-ELISA ، DIBA و TPIA انجام گردید. در پایان، ...
بیشتر
طی فصل زراعی سال 1382 تعداد 231 نمونه برگی از ذرت‌های آلوده به ویروس و دارای علایم موزائیک و در مواردی علایم موزائیک همراه با کوتولگی، از مزارع ذرت مناطق مختلف استان تهران جمع‌آوری گردید. با استفاده از آنتی‌سرم‌های پلی‌کلونال چهار پوتیویروس MDMV،SCMV ، SrMV وJGMV بر روی نمونه‌ها آزمون‌های سرولوژیکیDAS-ELISA ، DIBA و TPIA انجام گردید. در پایان، تمامی نمونه‌ها با آنتی‌سرم ویروس موزائیک نیشکر(SCMV) واکنش قوی بروز دادند و واکنشی با آنتی‌سرم سه پوتی ویروس دیگر مشاهده نگردید. نمونه‌ها در بافر فسفات پتاسیم 1/0 مولار (pH 7) حاوی 2 درصد پلی‌وینیل پایرولیدون (PVP) عصاره‌گیری و جدایه‌ها در گلخانه بر روی ذرت شیرین رقم 403 پارس و سورگوم دانه‌ای رقم کیمیا مایه‌زنی و تکثیر گردیدند. در آزمون‌های سرولوژیکی مجدد بر روی گیاهان مایه‌زنی شده نیز تنها حضورSCMV در آنها محرز گردید. در مطالعه دامنه میزبانی، جدایه‌های منتخبSCMV به روی Avena sativa، Panicum miliaceum، Pennisetum americanum Triticum aestivum، Hordeum vulgare و Setaria italica منتقل نشدند. خالص‌سازی ویروس به روش Minipurificationبر روی 2 گرم از بافت گیاهی آلوده انجام و غلظت ویروس خالص و نسبت A260/280 برای آن به ترتیب mg/ml 45/11 و 2/1 محاسبه شد. در بررسی الکترون میکروسکوپی به روش تلفیق سرولوژی و الکترون میکروسکوپی (ISEM) و دکوراسیون با آنتی‌سرم SCMV، پیکره‌های رشته‌ای قابل‌انعطاف SCMV در نمونه‌ها مشاهده و عکس‌برداری انجام شد. با انجام آزمون‌های SDS-PAGE و Western blotting بر روی نمونه‌های گیاهی آلوده و سوسپانسیون‌های ویروس خالص، وزن مولکولی پروتئین پوششی SCMV در حدودKDa 38-37 بود. آزمونRT-PCR با استفاده از جفت پرایمر SCMVF3 و SCMV R3 انجام گرفت و قطعات تکثیر یافته در حدود bp 900 بودند که تاییدی مضاعف بر حضور ویروس SCMVدر نمونه‌ها بدست آمد. بر اساس تحقیق حاضر ویروس موزائیک نیشکر پوتیویروس شایع و غالب و عامل اصلی موزائیک و موزائیک کوتولگی در مزارع ذرت استان تهران می باشد.
