c3518cb17d976b8

شناسایی پوتی ویروس غالب در مزارع ذرت استان تهران و بررسی پاره‌ای از خصوصیات آن

نویسندگان

چکیده

طی فصل زراعی سال 1382 تعداد 231 نمونه برگی از ذرت‌های آلوده به ویروس و دارای علایم موزائیک و در مواردی علایم موزائیک همراه با کوتولگی، از مزارع ذرت مناطق مختلف استان تهران جمع‌آوری گردید. با استفاده از آنتی‌سرم‌های پلی‌کلونال چهار پوتی‌ویروس MDMV،SCMV ، SrMV وJGMV بر روی نمونه‌ها آزمون‌های سرولوژیکیDAS-ELISA ، DIBA و TPIA انجام گردید. در پایان، تمامی نمونه‌ها با آنتی‌سرم ویروس موزائیک نیشکر(SCMV) واکنش قوی بروز دادند و واکنشی با آنتی‌سرم سه پوتی ویروس دیگر مشاهده نگردید. نمونه‌ها در بافر فسفات پتاسیم 1/0 مولار (pH 7) حاوی 2 درصد پلی‌وینیل پایرولیدون (PVP) ‌عصاره‌گیری و جدایه‌ها در گلخانه بر روی ذرت شیرین رقم 403 پارس و سورگوم دانه‌ای رقم کیمیا مایه‌زنی و تکثیر گردیدند. در آزمون‌های سرولوژیکی مجدد بر روی گیاهان مایه‌زنی شده نیز تنها حضورSCMV در آنها محرز گردید. در مطالعه دامنه میزبانی، جدایه‌های منتخبSCMV به روی Avena sativa، Panicum miliaceum، Pennisetum americanum Triticum aestivum، Hordeum vulgare و Setaria italica منتقل نشدند. خالص‌سازی ویروس به روش Minipurificationبر روی 2 گرم از بافت گیاهی آلوده انجام و غلظت ویروس خالص و نسبت A260/280 برای آن به ترتیب mg/ml 45/11 و 2/1 محاسبه شد. در بررسی الکترون میکروسکوپی به روش تلفیق سرولوژی و الکترون میکروسکوپی (ISEM) و دکوراسیون با آنتی‌سرم SCMV، پیکره‌های رشته‌ای قابل‌انعطاف SCMV در نمونه‌ها مشاهده و عکس‌برداری انجام شد. با انجام آزمون‌های SDS-PAGE و Western blotting بر روی نمونه‌های گیاهی آلوده و سوسپانسیون‌های ویروس خالص، وزن مولکولی پروتئین پوششی SCMV در حدودKDa 38-37 بود. آزمونRT-PCR با استفاده از جفت پرایمر SCMVF3 و SCMV R3 انجام گرفت و قطعات تکثیر یافته در حدود bp 900 بودند که تاییدی مضاعف بر حضور ویروس SCMVدر نمونه‌ها بدست آمد. بر اساس تحقیق حاضر ویروس موزائیک نیشکر پوتی‌ویروس شایع و غالب و عامل اصلی موزائیک و موزائیک کوتولگی در مزارع ذرت استان تهران می باشد.

کلیدواژه‌ها


عنوان مقاله [English]

Identification of the Prevalent Potyvirus on Maize in Corn Fields of Tehran Province and a Study on some of its Properties

نویسندگان [English]

  • mohammad reza mohammadi
  • mina koohi habibi
  • gholam hossein mosahebi mohammadi
چکیده [English]

Two hundred and thirty one leaf samples of virus infected and mosaic and as well dwarf mosaic symptoms showing maize plants from various corn fields in Tehran province were collected during the growing season 2003. By performing serological tests of DAS-ELISA, DIBA and TPIA, using SCMV, MDMV, SrMV and JGMV antisera, only SCMV was detected in samples, with all samples reacting strongly to the SCMV antiserum. SCMV was determined as the main and prevalent potyvirus on maize in Tehran province. The virus was transmitted to sweet corn and sorghum plants using 0.1 M potassium phosphate buffer (pH 7) containing %2 Polyvinyl Pyrrolidon (PVP) for mechanical inoculation. For propagation and maintenance in greenhouse, the virus was propagated on sweet corn cv. Pars 403 and on grain sorghum cv. Kimia. The host range study with selected isolates of SCMV showed that the virus isolates were not transmitted by mechanical inoculation on Avena sativa, Panicum miliaceum, Setaria italica, Pennisetum americanum, Hordeum vulgare and Triticum aestivum. Purification of isolates was done using a minipurification method. UV absorbance spectra were obtained for purified viruses a ratio of A260/280=1.2 being calculated. Electron microscopic study using ISEM and decoration method with SCMV antiserum revealed filamentous flexuous particles of SCMV. In SDS-PAGE and western blotting tests on infected samples and purified isolates, the molecular weight of the virus coat protein was approximately 37-38 KDa. A difference among the CP of various SCMV isolates however, was not detected. Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) was done using SCMV F3 and SCMV R3 primers. where amplified fragments were found of approximately 900 bp in size as expected. The study indicated that SCMV is the prevalent potyvirus and the main causal agent of mosaic and dwarf mosaic on maize plants in the province.

کلیدواژه‌ها [English]

  • ELISA
  • maize
  • Potyvirus
  • Sugarcane Mosaic Virus
  • Tehran province.