c3518cb17d976b8

نویسندگان

چکیده

قارچ Glomerella cingulataعامل بیماری آنتراکنوز درختان مرکبات در شمال و جنوب ایران است. 67 جدایه تک اسپور شده به دست آمده از درختان مرکبات استان مازندران برای این بررسی استفاده شد. تشخیص هموتال و هتروتال بودن قارچ در این آزمایش روی محیط اختصاصی YPSS انجام شد. برای تشخیص هموتال بودن، ابتدا جدایه‌ها به تنهایی روی این محیط کشت شدند و در نور متناوب و دمای ?C21 به مدت 21-15 روز قرار گرفتند. ارزیابی‌ها نشان دادند که 8/8% جدایه‌ها در کشت منفرد تولید پریتسیوم کردند و هموتال می‌باشند و سایر جدایه‌ها در کشت‌های منفرد تولید پریتسیوم نکردند. در تلاقی بین جدایه‌ها تحت شرایط فوق، تنها برای 12 تلاقی پریتسیوم بارور تولید گردید و 25% از جدایه‌ها به عنوان هتروتال تشخیص داده شدند. پریتسیوم‌های حاصل گرد با گردن دراز و دیواره صاف بودند. آسک‌ها به صورت مجتمع داخل پریتسیوم‌ها قرار گرفته و هر آسک دارای هشت آسکوسپور تک سلولی بود. از بین 67?جدایه 41 جدایه برای شناسایی گروه‌های سازگاری رویشی مورد آزمایش قرار گرفتند. جدایه‌ها برای به دست آمدن جهش یافتگان nit روی محیط واجد کلرات پنج درصد کشت شدند. تشخیص فنوتیپ جهش یافتگان nit به کمک محیط های افتراقی واجد نیتروژن انجام شد. سه جهش یافته nit 1، nit 3و nit M به ترتیب با فراوانی 66%، 56% و53% شناسایی شدند. برای گروه‌بندی جدایه‌ها، تلاقی جهش یافتگان nit جدایه‌های مختلف روی محیط MM انجام شد که ابتدا تلاقی‌های درون جدایه‌ای انجام شد تا جدایه‌های HSI حذف شوند که دو جدایه خود ناسازگار بودند. در آزمایش‌های سازگاری رویشی تمامی کشت‌ها و تلاقی‌ها در دمای ?C25 و در تاریکی قرار گرفتند. در تلاقی جهش یافتگان nit جدایه‌های مختلف، به جز سه تلاقی از کل، سایر تلاقی‌ها نتوانستند هتروکاریون تشکیل دهند. با بررسی‌ها دو گروه دو عضوی به دست آمد ولی سایر جدایه‌ها نتوانستند در تلاقی‌های بین جدایه‌ای هتروکاریون تشکیل دهند، اما با این حال نامگذاری شدند. جدایه‌هایی که در آزمایش باروری جنسی توانایی تشکیل پریتسیوم را داشتند (هموتال و هتروتال) با جدایه‌هایی که در بررسی گروه‌های سازگاری رویشی تشکیل هتروکاریون دادند، متفاوت بودند. در این آزمایش اکثر جدایه‌ها نتوانستند در تلاقی‌های بین جدایه‌ای هتروکاریون تشکیل دهند و به صورت تک عضوی باقی ماندند که بیانگر تنوع در بین جدایه‌ها می‌باشد. عامل ایجاد تنوع را می‌توان وجود چرخه جنسی و جهش دانست که در این تحقیق وجود باروری جنسی اثبات شد.

کلیدواژه‌ها

عنوان مقاله [English]

A Study on Sexual Fertility and a Determination of Vegetative Compatibility Groups among Glomerella cingulata Isolates from Citrus Trees in Mazandaran Province, Iran

نویسندگان [English]

  • Mona Khansari Atigh
  • Mohamad JavanNikkhah
  • Akbar Khodaparast
  • Mariyeh Babri
  • Keyvan Ghazanfari

چکیده [English]

Glomerella cingulata is the causal agent of anthracnose disease on citrus that attacks weakened trees. The sexual stage is rare in nature but can be produced in laboratory under certain conditions. Sixty-seven single-spore isolates were selected from citrus in Mazandaran province to be used in this study. Isolates were cultured on YPSS for investigating heterothallism and homothallism. To understand homothallism of isolates, they were cultured on YPSS alone and then placed at 21?C with 12h dark and 12h light for 15-21 days. An 8.8% of isolates were homothallic, while others were paired in YPSS of the above conditions to be investigated for heterothallism. 25% of the isolates were found as heterothallic. Perithecia of smooth walls along with necks were produced. Asci were in groups with any ascus containing 8 one celled ascospores. For VCG determination, forty one isolates were employed. Isolates were cultured on 5% MMC for selecting nit mutants. Two isolates could not grow on MMC and were found as wild types. After selecting nit mutants, they were cultured in media of different nitrogen sources for detecting phenotypes of nit mutants. The maximum percentage of nit occurred in the case of nit 1 (66%). Nit 3 was 56% and nit M 53%. The inter-isolate combinations started in MM among different nits of any isolate with two HSI isolates being found. Other 37 isolates were crossed together with different nits on MM with all the cultures being placed at 25?C in the dark. Thirty five VCGs were identified. The isolates that produced perithecium were different from the ones producing heterokaryons. Sexual stage along with sexual fertility is one of the factors of diversity that ended up with many groups in vegetative compatibility.

کلیدواژه‌ها [English]

  • .
  • Heterokaryon
  • Heterothallic
  • Homothallic
  • Nit mutants