c3518cb17d976b8

نویسندگان

1 دانشجوی سابق ارشد

2 دانشیار دانشگاه تبریز

3 دانشیار موسسه تحقیقات اصلاح و تهیه نهال و بذر

چکیده

ستلایت آران‌ای در برخی جدایه های ویروس موزاییک خیارCucumber mosaic virus, (CMV) سبب کاهش یا تشدید علائم این ویروس می‌شود. جهت بررسی وجود ستلایت آران-ای‌، نمونه‌های آلوده گیاهی مشکوک به CMV از میزبان‌های مختلف جمع‌آوری شدند. ابتدا با استفاده از روشهای سرولوژیک مانند DAS-ELISA و دیبا CMV ردیابی شد. به منظور بررسی بیشتر علائم و اثر احتمالی ستلایت آران‌ای بر روی علائم، آزمون تک لکه گیری با استفاده از گیاهان میزبان لکه موضعی انجام شد و سپس تک لکه‌ها جداگانه بر روی میزبان تکثیری مایه‌زنی شدند. گروه‌بندی علائم حاکی از ایجاد کلروز برخی از جدایه‌ها روی توتون بود که از اثرات بارز ستلایت آر‌ان‌ای روی علائم می‌باشد. با استفاده از یک جفت آغازگر اختصاصی منطبق بر منطقه رمز کننده پروتئین پوششی، CMV ردیابی شد که قطعه‌ای به طول 675 جفت باز تکثیر شد. ردیابی ستلایت آران‌ای با استفاده از یک جفت آغازگر اختصاصی CMV Sat-F و CMV Sat-R انجام شد که در واکنش زنجیره‌ای پلی مراز (PCR) قطعه‌ی مورد نظر به طول حدود 360 جفت باز در یکی از جدایه ها تکثیر یافت. مایه زنی های متعدد روی توتون و گوجه‌فرنگی نشان داد که وجود ستلایت آر‌ان‌ای موجب کاهش علایم CMV روی میزبان می شود که از خصوصیات بارز اثر non-necrogenic Satellite RNA بر روی علائم می‌باشد. این اولین گزارش ستلایت آر‌ان‌ای CMV از ایران می‌باشد.

کلیدواژه‌ها

عنوان مقاله [English]

Molecular Detection of Non-necrogenic Satellite RNA of Cucumber Mosaic Virus

نویسندگان [English]

  • davood koolivand 1
  • nemat sokhandan bashir 2
  • javad mozafari 3

چکیده [English]

Association of satellite RNA with Cucumber Mosaic Virus (CMV) leads to either attenuation or enhancement of the viral symptoms. For detection of the satellite RNAs in Iranian isolates of CMV, plant samples showing viral symptoms were collected from different farms in the provinces of East- and West- Azerbayjan and Ardebil. These samples were inoculated onto the experimental host plants in greenhouse with the virus being detected using common serological methods. To study the possible effects of the satellite RNA on symptoms of CMV, biological purifications were performed using local lesion and propagation hosts. One pair of primers, specific to the coat protein coding region of the virus was employed to detect CMV. Based on the behavior of CMV isolates on the test plants, especially on N.tabacum cv. Samsun on which the satellite RNA causes chlorosis, N.rustica, and also on tomato, seven isolates were found and designated as a group of the virus variants that cause chlorosis on N.tabacum cv. Samsun. For detection of the satellite RNA, a PCR product of about 360bp was amplified using a pair of specific primers(CMV-Sat –F and Sat-R) from one of the isolates. Several inoculations on tobacco and on tomato plants showed the possible presence of the satellite RNA attenuated CMV symptoms on the host plant, the characteristic of non-necrogenic Satellite RNAs. This is the first report from Iran on the possible presence of satellite RNA in CMV isolates

کلیدواژه‌ها [English]

  • Non-necrogenic
  • RNA satellite
  • RT-PCR